�����̔]�_�o�n�̌����́C�u�����C����v�Ƃ����������������āC�P��j���[�����i�v�f�j���x������]�V�X�e���𗝉����悤�Ƃ�����@�_���Ƃ��Ă����D����ɍŋ߂ł́C�d�C�����w�I�v���@�ɉ����C���q��`�w�I��@�C�C���[�W���O��@�C�����č\���_�I��@�i���Ƃ��C�V�~�����[�V������{�e�B�N�X�ɂ�铝���E�]����@�j�Ȃǂ��m������C�����]�̑S�j���[�����̍\���C�@�\��ԗ��I�ɕ��͂��C�����]�����邱�Ƃ��ł���悤�ɂȂ��Ă����D�����ł́C�����̔]���\������j���[�����̍\����@�\�̌����@�ɂ��ďЉ��D
���זE���v���Ɛ��F�@
���C���[�W���O
����`�q�H�w�I��@
���H�w�I��@
���זE���v���Ɛ��F�@
�܂��C�P��j���[�����̌`�Ԃ�@�\�̕��͖@����Љ��D�����]
(�}�PA)�ł́C�j���[�����̍זE�̂̓N���X�^�[���`�����C�]�\�ʂɕ��z����D���������āC�]����芮�S�ɓE�o���C�����H�����Ŗ��������X���C�h�O���X�ɌŒ肵���������C���������u�ƒ��쓮�����Ε������Y(LUMPlanFl/IR, �{��40�{�C�J����0.80, �쓮����3.4 mm ����� �{��60�{�C�J����0.90, �쓮����2.0 mm)�����������������(BX51WI�COlympus)�ɐݒu���C�ߐԊO��(�g��>775 nm)�ߏƖ�����ƁC�X�̃j���[�����̍זE�̂����o�����邱�Ƃ��ł���
�i�}�PB,C�j�D���������āC�ߐԊO����p��CCD�J����(C2741-79�C�l���z�g�j�N�X)�Ōv���Ώۂ̍זE�̌Q���Ƃ炦�C�f�������j�^���Ȃ���C3D�}�C�N���}�j�s�����[�^�[(ONU-31P�COlympus)�𑀍삵�ăK���X�����d�Ɂi10�`100M���j��ړI�̍זE�̂Ɏh�����邱�Ƃ��ł���
�i�}�PB,C�j�D
�@�d�ɓ��ɂ͂��炩���ߌu���F�f�����Ă����C�ʓd�ɂ��זE���ɒ������āC�j���[��������F����D�u���F�f�Ƃ��Ă�
Lucifer Yellow CH�C
Alexa Flour 568���邢�́C
Neurobiotin�i���̏ꍇ�CCy-3 conjugated avidin�ōR�̕W������j���g�p����D1�̔]�W�{�ɑ��ĕ����̈قȂ�j���[�������ɐ��F���邱�Ƃ�
�i�}�H�j�C�܂��_�o�`�B�����̖Ɖu�g�D�w�I���F�ƕ��p�i��d���F�j���邱�Ƃɂ��C�`�B�����̌��̓�����ł�
(�}�PD,E)�C�_�o��H��ǐՂ���ɂ͓s�����悢�D
�@�܂��C�d�ɂ��זE���Ɏh�����ꂽ���ǂ����́C���d�ʂ��画�f�ł���ƂƂ��ɁC���ۂɌu���F�f�𒍓�����l�q���C�u���Ɩ����u�ŗ�N���邱�Ƃɂ��m�F�ł���
(�}�PB, C)�D���̂悤�Ȏ�@�ɂ��C�����]�ŏ���Ɋ֗^���鑽���̃j���[�����̍\���Ƌ@�\�̃f�[�^�x�[�X�����s���C���̏������p���邱�Ƃɂ��C�J�C�R�K�̃t�F�������ɂ������v���O�����s���̂����݂�]�����o�H�C����ɂ͐_�o��H�̏���Ƃ��ĕ��͂��C�����ł���悤�ɂȂ����D
���C���[�W���O
�]�����͑����̃j���[�����̔��ɂ�萶����D�����̃j���[�����̎���ԓI�Ȋ������ɂ݂邽�߂ɂ͂ǂ�����悢���D���̓����̈���@�\���̌u���F�f��p�����C���[�W���O�ł���D�����͎�ɃJ�C�R�K�̚k�o�n�ꎟ�����ł���
�G�p�t(antennal lobe; AL)��ΏۂɁC�t�F���������܂߁C�����̎��ʂ̂����݂�T�邽�߁C�����h���ɂ�萶����G�p�t�̎���Ԋ������C���[�W���O�Z�p�ɂ��v�����Ă���
(�}.�H)�D
�_�o�n�̐����@�\�v���̂��߂̃C���[�W���O�Ƃ��Ă����Ƃ����y���Ă���̂�
�J���V�E�����u���F�f��p�������̂ł���D����́C�j���[�������ɃJ���V�E�����F�f�ׂ��Ču�����x�ω����v��������̂ł���D���̐F�f�̓J���V�E���Ɣz�ʌ������邱�Ƃɂ��C���q�̗��̍\�����傫���ς��u�����x���ω�����D�j���[�����̑O/��V�i�v�X�����ɂ̓J���V�E���Z�x�ω����������߁C�זE���ɃJ���V�E�����F�f�����݂��Ă�����������ԓI�Ɋώ@���邱�Ƃ��ł���D�F�f�𒍓�������@�̈��AM�@������DAM�́i�A�Z�g�L�V���`���G�X�e���́j�͖����ߐ��ł���C�זE���̃G�X�e���[�[�ɂ���čזE����AM��Ƃ�āC�{���̋@�\������悤�ɂȂ邽�ߍזE�O���畉�ׂł���D�������C�זE���̃J���V�E���Z�x�ω��ƃJ���V�E���u���F�f�̐����ɂ�莞�ԃX�P�[���͒x���Cin
vivo�ł͂P�b���x�ł���D�����̓J�C�R�K�G�p�t�ŁC�����h���ɑ��鉞�����v�����Ă���
�i�}�H�j�D
�ŋ߂ł́C��q�̂悤�Ɉ�`�q����Z�p�ɂ�����̃j���[������
�J���V�E�����^���p�N�i���Ƃ���
GCaMP�j�������Čv���ł���悤�ɂȂ�C�J�C�R�K�̃t�F���������Z�v�^��GCaMP�������C���̃C���[�W���O���\�ƂȂ��Ă���D
����C
���d�ʊ��F�f�͍זE���\�ʂɌ������C�j���[���������̋����E�}���i���d�ʕω��j�ɂ��זE���̕����ω��ɂ��C�u�����x���ω�����D���̕ω����͏������C�킸����0.1%���x�ł��邪�C���d�ʂڂ݂���̂����݂ł���D�����́C�G�p�_�o�i�G�p�t�ւ̓��́j�̓d�C�h���ɂ�萶����G�p�t�̎���ԉ����̌v���ɐ������Ă���
19)�i�}�H�j�D���̉����͐_�o�C�������̈�ł���Z���g�j���i5HT�j�̌��ʂɂ�葝�債�C�J�C�R�K�̃t�F�����������̊��x�����������ōs���邱�Ƃ����̌������疾�炩�ɂȂ��Ă���
19)�i�}�H�j.
�}�P�D�J�C�R�K�̔]�Ɣ]���\������P��_�o�זE�D(A) �J�C�R�K�̔]�̐��ʑ��D(B, C) ���������u������������������ɂ��C�iA)�̔]���ߐԊO��(�g��>775
nm)�ɂ�蓧�ߏƖ�����ƁC�X�̃j���[�����̍זE�̂����o�����邱�Ƃ��ł���D3D�}�C�N���}�j�s�����[�^�[�𑀍삵�ăK���X�����d�ɂ�ړI�̐_�o�זE�̍זE�́i��j�Ɏh�����C�d�ɓ��̌u���F�f�𒍓����Đ��F����D�iD)
���F�����P��̐_�o�זE�D�iE) �iD)�̔]�W�{�ɑ��Đ_�o�`�B�����̖Ɖu�g�D�w�I���F�p�i��d���F�j���邱�Ƃɂ��C�`�B�����̌�����肷��D�����ł́C�}�����̐_�o�`�B�����ł���GABA�Ɖu�g�D���F���ɍs�����Ƃɂ���āC�iD)�̐_�o�זE��GABA�}�����_�o�ł��邱�Ƃ��킩��DGABA�}�����_�o�͐ԐF�Ɍu���W�������D�X�P�[���F1mm�iA)�C100um�iB-E)�D
����`�q�H�w�I��@
�ߔN�̑�K�͂�DNA�z��Z�p�̐i�W�ɂƂ��Ȃ��C�����̈�`���ł���Q�m���z�����̎�Ō��肳��Ă���D�J�C�R�K�ɂ����Ă��Q�m���v���W�F�N�g���قڊ������C��`�q�z�ԗ��I�ɖ��炩�ɂ���Ă���
10),11)�D���̂悤�Ȉ�`�q���Ɋ�Â��āC�זE����������Z�p�Ƃ��đg�D����mRNA�����o����
in situ hybridization�@�C�^���p�N�������o����
�Ɖu�g�D���w�I��@�C������
�g�����X�W�F�j�b�N�Z�p��
��`�q�v�����[�^�[�𗘗p����
���q��`�w�I��@����������D
�O��2�̎�@���g�D�̌Œ��K�v�Ƃ��u���v�����ł����K�p�ł��Ȃ��̂ɑ��C���q��`�w�I��@�́u�������v�����̍זE��in vivo�ʼn����ł���Ƃ����傫�ȗ��_������D����ɁC���̎�@�͒P�Ƀj���[�����̉����ɂƂǂ܂炸�C�_�o�`�B�̑j�Q�ɂ�����̐_�o��H�̋@�\��͂�@�\��`�q�̓����ɂ��j���[�����̋@�\���ς�in vivo�ōs�����Ƃ��\�ɂ��C��`�q����s�����u�݂�v���߂ɕK�v�s���ȋZ�p�ƂȂ��Ă���D
���̂悤�ȕ��q��`�w�I��@�ɂ��]�_�o�n�̉�͂͂���܂ň�`�q����Z�p�̔��B����
�L�C���V���E�W���E�o�G�i
Drosophila melanogaster�j�̓ƒd��ł��������C2000�N�ɓc����ɂ��C�J�C�R�K�Ńg�����X�W�F�j�b�N�̂̍�o�@���m������
12)�C�J�C�R�K�]�_�o�n�̌����ɕ��q�����w�I��@�����邱�Ƃ��ł���悤�ɂȂ����D�����ł͂���ꂪ�i�߂Ă���J�C�R�K�]�_�o�n�ւ̕��q��`�w�I��@�̓K�p�ɂ��ďЉ��D
�J�C�R�K�ł́C
�g�����X�|�]���̈��ł���
piggyBac�𗘗p�����g�����X�W�F�j�b�N�̂̍�o�@���m������Ă���
12)�D�g�����X�W�F�j�b�N�̂œ���̃j���[�����ŊO����`�q�������邽�߂ɂ́C�^�[�Q�b�g�Ƃ���זE�Ŕ������邱�Ƃ��m���Ă����`�q�̃v�����[�^�[�̈�𗘗p����
�iFig. 7A�j�D�j���[�������������邽�߂̃��|�[�^�[��`�q�Ƃ��Ă͐��F�̑���̕K�v���Ȃ��C��������������ԂŌ��o�ł���
�ΐF�u���^���p�N���iGFP�j�C
�ԐF�u���^���p�N���iDsRed�j�Ȃǂ̌u���^���p�N������Ɏg�p�����D
�}�H�ɐl�H�v�����[�^�[�ł���3xP3�v�����[�^�[��p���āC�J�C�R��Ɨc���̒P��̊��o�j���[������DsRed�ʼn�����������������D�����̃��|�[�^�[��`�q�͔�r�I�ψ�ɍזE���ɕ��z���邽�߁C���������j���[�����S�̂̌`�Ԃ��������邱�Ƃ��ł���D
Fig. 7 Schematic diagram of reporter gene expression systems in transgenic
silkmoths. (A) In the promoter-reporter system, promoter sequence is placed
immediately upstream of reporter gene and directly activates reporter gene
expression. (B) In the GAL4-UAS system, reporter gene expression is activated
via GAL4-UAS yeast transcriptional system.
����ŁC�V���E�W���E�o�G�ł͍זE���Ǎ݃V�O�i���z���t�������u���^���p�N����p���邱�ƂŁC�V�i�v�X���[�Ȃǃj���[�����̓���̗̈�̉������Ȃ���Ă���C�J�C�R�K�ł����̂悤�ȃ��|�[�^�[�n���̍�o���҂����D�܂��C���|�[�^�[��`�q�ɃJ���V�E�����u���^���p�N��G-CaMP��p���邱�ƂŐ_�o�����̃C���[�W���O���s�����Ƃ��ł���D�����g�����X�W�F�j�b�N�n�����͈̌̂�`�I�ɋψ�ł��邽�߁C��x�g�����X�W�F�j�b�N�n������o����C�قȂ�̂œ����זE��W�����邱�Ƃ��ł���D
�v�����[�^�[�ɂ�铱����`�q�������߂̔��W�^�Ƃ���
�y��R���]�ʈ��qGAL4�Ƃ��̕W�I�z��ł���
UAS�𗘗p����
GAL4-UAS�V�X�e�����V���E�W���E�o�G�𒆐S�ɍL�͂Ɏg���Ă���D���̃V�X�e���ł́C�v�����[�^�[����GAL4��`�q�z����Ȃ����g������`�q�����n����UAS���Ƀ��|�[�^�[��`�q���Ȃ����g�݊�����`�q�����n����ʌɍ�o����D���҂���z���ē���ꂽ������̂ł�GAL4��UAS�Ɍ������C���|�[�^�[��`�q����������
(Fig. 7B)�DGAL4-UAS�V�X�e���̗��_�Ƃ��āC�����זE�̓��ِ������肷��GAL4�n���ƁC���|�[�^�[��`�q������UAS�n�����ʂ̌n���Ƃ��ĕ�������Ă��邱�Ƃ���������D���Ȃ킿�CUAS�����ɈقȂ��`�q���Ȃ����n������z�ɗp���邱�ƂŁC�P��̌�z�����ɂ��ȕւɂ��܂��܂ȃ��|�[�^�[��`�q��G�t�F�N�^�[��`�q���זE�ōČ��I�ɔ����ł���D
�J�C�R�K�ɂ����Ă�2003�N�ɍ�����ɂ��CGAL4-UAS�V�X�e�����̑g�D�Ő���ɋ@�\���邱�Ƃ����ꂽ
13)�D�����ł����͂܂��CGAL4-UAS�V�X�e�����]�_�o�n�Ő������@�\���邱�Ƃ������邽�߂ɁC�Q��ނ̐_�o�y�v�`�h�z�������̃v�����[�^�[�z��̉�����GAL4�����g�����X�W�F�j�b�N�n�������ꂼ���o�����D�����̌n����UAS-GFP�n���̌�z�œ���ꂽ������̂ł͐_�o�y�v�`�h����זE�œ��ٓI��GFP�u�����ώ@���ꂽ
�i�R�`��C���e���j�D���̌��ʂ́C��`�q�v�����[�^�[�𗘗p���ăJ�C�R�K�]�̓���̃j���[�������������邽�߂�GAL4-UAS�V�X�e�����L�p�ł��邱�Ƃ������Ă���D
�����ŁC���̃V�X�e���𗘗p���ăt�F���������̐G�p����]�ւ̋�ԓI�ȏ����̓p�^�[���ׂ邽�߂ɁC�t�F�������听���ł���
�{���r�R�[���̎�e�̈�`�q
BmOR114)�ƕ������ł���
�{���r�J�[���̎�e�̈�`�q
BmOR315)�̃v�����[�^�[�̈扺��GAL4������n������o�����D����܂łɁC�����̌n����UAS-GFP�n���̌�z�œ���ꂽ������̂̉�͂���C�G�p�Ŏ�e���ꂽ�{���r�R�[���ƃ{���r�J�[���̏�C�k�o�n�ꎟ�����ł���G�p�t�̈قȂ�̈�ɓ`�B����邱�Ƃ����o���Ă���i�N���C�����\�j�D����ɁC������GAL4�n����UAS-GCaMP�n���ƌ�z���C�G�p���t�F�������Ŏh�������Ƃ��̐G�p�t�̃J���V�E���C���[�W���O�ɐ������Ă���D
���̂悤�ɁC�J�C�R�K�̃t�F����������Ɋ֗^����j���[�����Q�̍\���Ƌ@�\�̗����ɕ��q��`�w�I��@�����p�ł���悤�ɂȂ��Ă����D����̉ۑ�Ƃ��āC�őf��`�q�Ȃǂ̍זE����_�o�`�B��j�Q�����`�q������UAS�n������o���邱�Ƃ���������D����ɂ��C���������j���[�����̋@�\��j�Q���C����̐_�o��H���t�F����������ʍs���ɉʂ����������̃��x���Œm�邱�Ƃ��ł���D����ɂ́C���������j���[�����ɋ@�\��`�q�����C�ϋɓI�Ƀj���[�����̋@�\�����ς��邱�Ƃ��\�ɂȂ邾�낤�D���Ƃ��C�C�I���`���l����_�o�`�B������e�̈�`�q�̓����ɂ��j���[�����̓�������`�q���x���ʼn��ς��邱�ƂŁC�t�F����������ʍs���̊�ɂ���_�o��H�̋@�\�����ς��C�s����l�דI�Ƀf�U�C�����邱�Ƃ��ł���悤�ɂȂ邩������Ȃ��D